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一管式点突变试剂盒
One Tube Mutagenesis kit

1709-一管式点突变试剂盒
量:      
目录编号 包装单位
170901 10次
170902 20次
 
产品储存:-20℃ 保存,有效期12个月。由于试剂盒中提供的反应缓冲液及dNTP等成份是为反应专门优化的,所以不要用其它的反应缓冲液及dNTP等代替。

制品说明:本定点突变试剂盒是基于PCR原理向目的DNA片段(一般为质粒)中引入碱基的点突变,多个邻近密码子的突变,单个或多个邻近密码子的缺失(deletion)或插入(insertion)等。一般宿主菌培养扩增的质粒DNA是甲基化的,PCR扩增新合成的DNA是非甲基化的。首先以待突变的甲基化质粒为模板,利用高保真的SuperPfu聚合酶实现突变质粒的合成(非甲基化,包含突变点,且有两个缺刻点nick点),再利用Dpn I酶选择性降解甲基化的模板质粒 ,剩下的新合成非甲基化的突变质粒转入大肠杆菌后,质粒中有两个nick位点可以被大肠杆菌修复,得到的克隆就会含有预期的突变质粒了。一般可以产生大于90%的突变效率。

适用范围< 10kb甲基化质粒中核苷酸的突变。

特点:
1、简单,一个PCR管中完成所有操作,速度最快。
2、采用部分重叠引物设计,使PCR呈指数扩增,扩增产物凝胶电泳可见增加成功率。
3、效率高,使用Dpn I去除非突变模板,突变效率高达90%;不需要使用特殊感受态细胞降解非突变质粒。
4、采用分子进化改造的SuperPfu可以提供4倍-6倍于pfu的扩增速率提高和3倍于pfu的超高保真性。